Бесплодие — серьезная проблема, с которой в мировой практике сталкивается 13–15% семей1. Считается, что в 20% случаев проблема находится на стороне мужчины, а еще в 30–40% случаев у пары есть факторы и мужского, и женского бесплодия. При этом выявление точной причины бесплодия иногда требует тщательного обследования обоих партнеров и проведения специализированных анализов. Один из них — тест на наличие в мужской сперме антиспермальных антител (АСАТ), или MAR-тест. Что это за исследование, в каких случаях оно назначается и как правильно сдавать этот анализ, рассказывают специалисты портала Women First.ru.
MAR-тест: общая информация
Наличие антиспермальных антител в биоматериале мужчин с диагностированным бесплодием было впервые обнаружено в 1954 году. Антитела, или иммуноглобулины — особые молекулы, которые вырабатывает иммунная система человека для борьбы с возбудителями инфекций, аллергенами, токсинами и другими чужеродными веществами. В норме эти клетки выполняют важную и полезную для человеческого организма функцию.
Однако в некоторых случаях иммунная система вырабатывает антитела к белкам собственных клеток, что вызывает их повреждение. Такие антитела называют аутоагрессивными, или аутоантителами. Аутотела, которые вырабатываются иммунной системой к антигенам сперматозоидов, называются антиспермальными.
В небольшом количестве антиспермальные антитела присутствуют примерно у 12,9% мужчин в популяции2. Однако клиническую значимость этот показатель приобретает, только если количество АСАТ достигает высокого уровня. При этом у мужчин с бесплодием АСАТ обнаруживаются в 3,9–15,6% случаев (в зависимости от порогового значения), тогда как у мужчин с нормальной фертильностью этот показатель меньше в 4,3–6,2 раза (0,9–2,5%)3.
Деятельность иммуноглобулинов оказывает негативное воздействие на мужскую детородную функцию и возможность успешного зачатия:
- нарушается образование мужских половых клеток в семенных канальцах;
- развивается оксидативный стресс сперматозоидов, который ассоциирован с идиопатическим бесплодием4;
- повышается вязкость спермы, что ведет к нарушению подвижности сперматозоидов5;
- повышается риск нарушений в ранних эмбриональных процессах, имплантации и развитии плода, причем не только при зачатии естественным путем, но и при использовании вспомогательных репродуктивных технологий.
MAR-тест — это анализ на смешанную иммуноглобулиновую реакцию, который позволяет оценить количество АСАТ, прикрепленных к плазматической мембране сперматозоидов. В лабораторной практике обычно используют тесты для выявления специфических антител классов IgA и IgG. Антитела класса IgA выделяются местно и указывают на нарушение гематотестикулярного барьера. Антиспермальные антитела класса IgA поступают из системного кровотока.
Считается, что высокий уровень АСАТ IgA имеют большее клиническое значение в диагностике бесплодия, чем IgG. Однако антитела IgG более чем в 95% случаев обнаруживаются в образцах, положительных по IgA6.
Тест на антиспермальные антитела сдается только вместе с общей спермограммой или после нее.
Проведение MAR-теста возможно прямым и непрямым методом. Прямой метод предусматривает оценку наличия иммуноглобулинов непосредственно в образце эякулята. Однако для проведения анализов прямым методом необходимо наличие в сперме достаточного количества живых подвижных сперматозоидов. Если концентрация активных сперматозоидов недостаточна, проводятся непрямые тесты. При этом используется донорская спермиоплазма и кровь пациента.
Одновременно с MAR-тестом у мужчин может выполняться исследование на антиспермальные антитела шеечной слизи у женщин. При этом оценивается наличие или отсутствие в шеечной слизи антител к сперматозоидам партнера. Если антитела присутствуют, они повреждают сперматозоиды мужчины, тем самым формируя шеечное бесплодие.
Когда нужно сдавать MAR-тест
Наличие показаний к сдаче MAR-теста обычно оценивается андрологом или репродуктологом по результатам предварительного обследования мужчины, его анамнеза и результатов общей спермограммы. На необходимость проведения MAR-теста могут указывать такие находки по результатам спермограммы, как:
- Агглютинация сперматозоидов — соединение мужских половых клеток между собой головками, шейками или хвостами, что препятствует оплодотворению яйцеклетки. Наличие АСАТ рассматривается как одна из причин, вызывающих агглютинацию. Антиспермальные антитела обнаруживаются у 30% мужчин с этой патологией, тогда как у пациентов без агглютинации этот показатель не превышает 3%3.
- Астенозооспермия — сниженная подвижность сперматозоидов и ухудшение их способности к целенаправленному передвижению в сторону яйцеклетки.
Также рекомендуется выполнить MAR-тест, если зарегистрированы другие отклонения по результатам спермограммы, например, олигозооспермия (уменьшение концентрации живых сперматозоидов), азооспермия (отсутствие сперматозоидов в эякуляте).
Показанием для проведения MAR-теста также является наличие в анамнезе мужчин травм, хронических заболеваний и других патологических состояний, которые могут повлиять на репродуктивную функцию:
- травма яичек, придатков яичек и мошонки;
- хирургические операции на яичках или мошонке;
- перекрут яичка;
- рак яичка;
- крипторхизм (неопущение яичка);
- хронические или перенесенные острые заболевания мочеполовой системы;
- варикоцеле.
Все эти состояния могут нарушать гематотестикулярный барьер, который в норме защищает от иммунной системы организма сперматозоиды, обладающие аутоантигенной активностью. При нарушении барьера иммунитет запускает аутоиммунную реакцию, которая и становится фактором иммунологического бесплодия.
Важно, что иногда антиспермальные антитела обнаруживаются и у пациентов с нормальными показателями общей спермограммы, а также без предрасполагающих факторов в анамнезе. Поэтому без специализированного анализа наличие иммунологического бесплодия выявить и подтвердить невозможно. Минздрав рекомендует сдачу MAR-теста всем мужчинам с жалобами на бесплодие7. При этом наличие только антиспермальных антител не позволяет однозначно судить об аутоиммунном бесплодии. Для этого необходимы дополнительные исследования6.
Как подготовиться к анализу
Чтобы результаты MAR-теста были информативными и достоверными, мужчине важно правильно подготовиться к сдаче анализа. При подготовке к лабораторному исследованию пациент должен8:
- Воздерживаться от половых контактов и эякуляции в течение 2–7 дней перед анализом.
- Воздерживаться от алкоголя в течение всего периода подготовки.
- Отказаться от приема лекарственных препаратов, кроме назначаемых врачом по показаниям здоровья для постоянного применения.
- Избегать воздействия УВЧ.
- Исключить воздействие высоких температур (горячие ванны, сауны, бани, длительное нахождение на открытом солнце в летнее время).
- Поддерживать сбалансированное полноценное питание.
- За сутки до сдачи анализа — исключить интенсивные нагрузки, тяжелый физический труд, стрессы.
Как проводится анализ
Эякулят собирается методом мастурбации. Для сбора биоматериала мужчине выдают подготовленный стерильный контейнер с широким горлом. Использовать при сборе образца обычные презервативы не допускается, так как они содержат спермициды и вещества, снижающие активность сперматозоидов. Контейнер должен храниться при температуре 20–37 °C и быть доставлен в клинику или лабораторию в течение 30 минут после сбора биоматериала.
В ходе исследования образец эякулята помещается на предметное стекло и смешивается с равным количеством специальной суспензии, содержащей микрогранулы латекса. После этого к сыворотке добавляют антисыворотку IgG. Если в биоматериале присутствуют антитела, латексные гранулы прикрепляются к сперматозоидам. Спустя короткий период инкубации (примерно 3 минуты) через микроскоп с увеличением 400× оценивается количество подвижных сперматозоидов с прикрепленными к ним шариками. Через 10 минут образец исследуется повторно. Потом процедуру повторяют с антителами IgA.
Тест позволяет определить наличие АСАТ, их расположение на поверхности сперматозоидов, процент затронутых клеток. ВОЗ не дает четких референсных значений для оценки результатов MAR-теста как положительных или отрицательных. Каждая лаборатория должна определить собственные референсные диапазоны. Российские врачи положительным результатом обычно считают, если в образце количество агглютинированных сперматозоидов равно или превышает 40%2.
Лечение иммунологического и идиопатического бесплодия представляет собой сложную задачу. Пациенту назначается поддерживающая антиоксидантная или витаминная терапия, препараты для лечения хронического воспаления, глюкокортикоиды. Таким образом, обследование на антиспермальные антитела помогает установить причину бесплодия у пациентов с нормальными базовыми анализами и дарит надежду на рождение ребенка многим парам.